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胎牛血清在細胞培養中的作用是什么?
胎牛血清
是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
胎牛血清在細胞培養中的作用:其是細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。
1.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。
2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。
3.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋*酶
失活,保護細胞不受傷害。
4.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
胎牛血清使用注意事項:
血清是否滅活:加熱可滅活血清中補體系統,在極少數情況下(培養ES細胞,平滑肌細胞時)建議滅活,在培養其余細胞時不建議滅活血清。血清滅活非常容易產生沉淀,如必須滅活請按56℃,30 min,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產生沉淀。
無血清培養基:無血清培養基在結果重復性、細胞體外分化方面有優勢,但是,血清仍然是培養液中最基本的添加物,尤其是在原代培養或細胞生長狀態不良時,常常會先使用有血清的培養液進行培養,待細胞生長旺盛后再換成無血清培養液。
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